克雷伯菌属是条件致病菌，临床感染中以肺炎克雷伯菌多见，本属细菌因能产生超广谱 β-内酰胺酶(EBSLs)等耐药机制，导致对常用的 β-内酰胺类抗生素耐药，是引起医院感染的重要病原菌。 为了解本院临床标本分离出的克雷伯菌情况。 我们对从本院临床各种标本中分离出的克雷伯菌进行回顾性分析，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 克雷伯菌株来自本院 20xx 年 5 月至 20xx年 5 月各类临床标本包括呼吸道分泌物、 生殖道分泌物、尿液、粪便等。1.2 菌株分离及鉴定 所有克雷伯菌的培养、分离、鉴定均按《全国临床检验操作规程》[1]进行。1.3 超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)检测方法[2]：当通过筛选法时对头孢泊肟、头孢他啶(10μg/片)抑菌圈≤22mm 或氨曲南、头孢噻肟(30μg/片)≤27mm 的菌株经头孢他啶(10μg/片)、头孢他啶/克拉维酸(30/10μg)确证试验，加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌圈相比，增大值≥5mm 即判定为产 EBSLs 克雷伯菌株。1.4 培养基 SS 琼脂、 麦康凯琼脂、M-H 琼脂等由北京陆桥技术有限责任公司提供。 肠杆菌科细菌生化常规鉴定管由广东环凯微生物科技有限公司提供。1.5 药敏纸片 阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明、庆大霉素、头孢唑啉、头孢曲松、亚胺培南、氯霉素。 以上 8 种药敏纸片由北京天坛生物药品有限公司生产， 均在有效期内使用。头孢泊肟(10μg/片)，氨曲南(30μg/片)，由美国 BBL 公司提供。1.6 被检菌和质控菌液的制备 挑取纯培养平板上的菌落用无菌生理盐水矫正菌液浓度， www.dxs89.com www.dxs89.com 使与麦氏比浊管 0.5 的比浊相同，菌落计数相当于 1.5×108/ml。1.7 操作 用无菌镊子取药敏纸片平贴于涂有菌液的培养基表面，每张纸片的距离不少于 24mm，纸片的中心距平板的边缘不少于 15mm。1.8 药敏判断标准及质控 严格按美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定的培养基、操作方法、药敏纸片和判定标准进行。 每周用质控株随临床分离株一道进行药敏试验，质控株的药敏结果在质控允许范围内。
2 结果
2.1 产 EBSL 克雷伯菌分离情况 四年来分离出克雷伯菌属 71 株，其中产 EBSLs 克雷伯菌为 11 株，占 22.5%。2.2 克雷伯菌属分离情况 71 株克雷伯菌属中， 肺炎克雷伯菌 61 株，占 85.9%，产酸克雷伯菌 5 株，占 7.0%，臭鼻克雷伯菌 3 株，占 4.2%，鼻硬结克雷伯菌 2 株，占 2.8%，见表 1。2.3 克雷伯菌属对药物的敏感性药敏试验结果 阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明、庆大霉素、头孢唑啉、头孢曲松、头孢泊肟、氨曲南、亚胺培南、氯霉素的耐药率分别为 16.9%(12/71)、100.0%(71/71)、26.8%(19/71)、18.3%(13/71)、91.6%(65/71)、19.7%(14/71)、21.1%(15/71)、23.9%(17/71)、0.0%(0/71)、46.5(33/71)。
3 讨论
克雷伯菌属为革兰阴性杆菌，共有 7 个种。 本次调查我们从 4 类标本中分离出 4 种克雷伯菌，其中肺炎克雷伯菌分离出 61 株，占 85.9%，以呼吸道标本分离出最多。 肺炎克雷伯菌是临床标本中常见的细菌， 可引起典型的原发性肺炎，也能引起各种肺外感染包括肠炎和脑膜炎(婴儿)，泌尿道感染及菌血症。 呼吸道感染的肺炎克雷伯菌主要来源于患者自身鼻咽部定植的肺炎克雷伯菌。 在各种因素破坏鼻咽部正常定植的菌群后进入呼吸道导致感染。 此外，使用呼吸机的患者尚可发生肠道肺炎克雷伯菌经胃、咽、下呼吸道的逆向移行和移位导致感染性肺炎。 生殖道和胃肠道也是克雷伯菌寄居场地，在机体的抗病能力减弱时，在正常菌群寄居部位改变后，发生定位转移，常引起克雷伯菌感染，导致****炎或腹泻。由表 2 可见，71 株克雷伯菌除了对亚胺培南全敏感外，对多种抗生素产生多重耐药性，特别是对第一代头孢菌素类头孢唑啉敏感性仅为 4.2%，对其它 8 种抗生素的敏感性也都在 78.9%以下，临床上采用这几种抗生素治疗克雷伯菌效果已不理想，抗生素治疗区越来越窄。 近年来报道克雷伯菌属感染的病例有所增加， 一些不常见的克雷伯菌也陆续被检出，且大都为多重抗药性的菌种，治疗已成棘手问题，特别是产 ESBLs 的克雷伯菌, 不论其体外药物敏感试验结果如何，对青霉素,头孢菌素和氨曲南治疗无效，因此，临床上分离出的克雷伯菌必须做 ESBLs 监测。值得注意的是本院分离出的克雷伯菌已有 22.5%的菌株产 ESBLs， 对第三代头孢菌素类亦产生了耐药性，因此，亚胺培南已成为本院治疗克雷伯菌感染的首选药物，建议规范使用抗生素，暂时停用那些连续多年应用于临床治疗克雷伯菌的第三代头孢菌素类，一两年后再继续应用，间隔一段时间后再用药，耐药性降低，疗效会更佳。 www.dxs89.com
参 考 文 献
[1] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].第二版,南京:东南大学出版发行, 20xx:804～809.
[2] 张卓然.临床微生物学和微生物检验[M].第 3 版,北京:人民卫生出版社, 20xx:508～509.
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